法氏囊抗體檢測試劑盒

                                        使用說明書

臨床意義

      雞傳染性法氏囊病是由傳染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV）引起雞的一種急性、高度接觸性傳染病。本病主要特征是突然發(fā)病、病程短、發(fā)病率高、病雞嚴重萎頓、白色下痢、法氏囊B淋巴細胞損傷、雞體免疫能力受到抑制，雞感染后體內(nèi)會產(chǎn)生特異性抗體。檢測特異性法氏囊抗體可作為該病疫苗免疫狀況及輔助診斷指標(biāo)。

       本試劑盒采用法氏囊抗原作固相抗原檢測雞血清中的特異性法氏囊抗體。本試劑靈敏度高，特異性強，重復(fù)性好，操作方便快速，可分多次使用。

試劑組成

1.預(yù)包被板48T/96T;                             6.樣本稀釋液（5號液）1支;

2.酶結(jié)合物（1號液）1支;                          7. 終止液（6號液）1支;

3.洗滌液（2號液）1支;                             8. 陽性對照品1支;

4.底物（3號液）1支;                                9. 陰性對照品1支;

5.顯色劑（4號液）1支;                            10.使用說明書1份;

操作程序

1. 樣本稀釋：用樣本稀釋液（5號液）將待檢血清按1:100稀釋,如5ul血清＋500ul樣本稀釋液，充分混勻。陰、陽對照不用稀釋。

2. 加樣反應(yīng)：樣本檢測孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各一孔，取陰性、陽性對照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi)，空白對照孔僅加入100ul樣本稀釋液（5號液）。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液（2號液）一滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去，拍干。

3. 加酶反應(yīng)：除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物（1號液）二滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。

4. 顯色反應(yīng)：加底物（3號液）和顯色劑（4號液）各一滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號液）一滴，混勻，終止反應(yīng)（加終止液后藍色會變?yōu)辄S色）。

結(jié)果判斷

1.肉眼觀察：陰性對照接近無色，陽性對照呈明顯黃色，表示試驗有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。

2.儀器判斷：以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.05時按0.05計算。

注意事項

1.試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。

2.洗滌時將蒸餾水加滿孔內(nèi)，每次停放三十秒鐘后甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。

3.為提高試驗的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果，并對陰性對照測復(fù)孔以減少誤差。

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